产品货号:
KD3027
中文名称:
Bradford蛋白浓度测定试剂盒
英文名称:
Bradford Protein Assay Kit
产品规格:
2500T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒是根据Bradford法研制而成,实现了蛋白浓度测定的快速,稳定和高灵敏度。
Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。耐受β-巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的去垢剂影响,需确保SDS低于0.05%,Triton X-100低于0.05%,Tween 20、Tween 60或Tween 80低于0.02%,含去垢剂的样品推荐使用BCA蛋白浓度测定试剂盒。
组分 | 规格 | 保存 |
G-250染色液(5×) | 100mL | 常温 |
PBS稀释液 | 30mL | 常温 |
BSA蛋白标准液(5mg/mL) | 1mL | 2~8℃ |
- 检测速度快:10~20个样品只需不足10分钟即可完成;
- 灵敏度高:检测浓度下限达25μg/mL,最小检测蛋白量达到0.5μg,样品体积1~20μL;
- 在50~1000μg/mL浓度范围内有较好的线性关系,且1小时内稳定,5~20min之间,稳定性最好。
BSA蛋白标准液(5mg/mL)为PBS溶解的冻干粉,加入1mL水溶解后,-20℃保存。
注意事项:
- G-250染色液(5×)使用前请颠倒3~5次,混匀。
- BSA蛋白标准液请在完全溶解后先混匀,再稀释成BSA蛋白标样。
- G-250染色液恢复到室温再使用,有利于提高检测的灵敏度。
- 需可检测560~610nm之间波长的酶标仪一台,最佳检测波长为595nm。并需96孔板。
使用说明:
- 取适量BSA蛋白标准液,用PBS稀释液稀释至终浓度为0.5mg/mL,即为BSA蛋白标样。
- 取适量G-250染色液(5×),按1∶4加水稀释成1×G-250染色液,需现配现用。
- 将BSA蛋白标样,以及适当稀释的蛋白样品,按下表顺序加入96孔板中,标样需用PBS稀释液补足到20μL。每孔加入1×G-250染色液200μL,室温放置3~5min。
加样顺序 标样编号 样品编号 标记编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 BSA蛋白标样 0 1μL 2μL 4μL 8μL 12μL 16μL 20μL 20μL
样品... PBS稀释液 20μL 19μL 18μL 16μL 12μL 8μL 4μL 0 1×G-250染色液 200μL - BSA标样浓度(μg/mL)分别为:0、25、50、100、200、300、400、500。
- 用酶标仪测定A595的吸光度,或选择560~610nm之间波长。绘制标准曲线并计算出样品中的蛋白浓度。
Bradford与BCA蛋白定量对样品中化学成分的耐受范围:
名称 | BCA | Bradford |
Ammonium Sulfate | 1.5M | 1.0M |
Brij-35 | 5.00% | 0.12% |
CHAPS | 5.00% | 5.00% |
EDTA | 10mM | 100mM |
EGTA | 0 | 50mM |
Hepes | 100mM | 100mM |
Glycine(pH2.8) | 100mM | 100mM |
Guanidine HCl | 4.0M | 3.5M |
Tween 20、Tween 60、Tween 80 | 5.00% | 0.06% |
SDS | 5.00% | 0.10% |
Sodium Acetate(pH5.5) | 200mM | 180mM |
Sodium Chloride(NaCl) | 1.0M | 5.0M |
Sucrose | 40% | 10% |
Sodium Hydroxide(NaOH) | 0.1M | 0.1M |
NP-40 | 5.00% | 0.50% |
Triton X-100 | 5.00% | 0.10% |
Urea | 3.0M | 3.0M |
DTT | 1mM | 5mM |
β-mercaptoethanol | 1mM | 1M |
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